煮沸消毒滅菌法把誰(shuí)煮沸100攝氏度，要幾分鐘可以殺死細(xì)菌繁殖體，幾小時(shí)可以殺死芽胞？

 

1．熱力消毒
微生物的代謝作用，包括化學(xué)和物理的反應(yīng)，深受溫度的影響，在一定范圍內(nèi)提高溫度可以加速微生物的呼吸作用。溫度在微生物的活動(dòng)中起著非常重要的作用。阻止工藝用水系統(tǒng)內(nèi)細(xì)菌生長(zhǎng)的*有效、*可靠的辦法就是系統(tǒng)在高于細(xì)菌生存的溫度下運(yùn)行操作。一般情況下，微生物生長(zhǎng)的溫度范圍大約為-5℃～80℃，就某一種微生物而言，其適合生長(zhǎng)的溫度范圍通常較窄，這個(gè)*適合微生物生長(zhǎng)的溫度叫做某種微生物生長(zhǎng)的*適合溫度，在這個(gè)溫度范圍內(nèi)，該種微生物生長(zhǎng)*快。微生物生長(zhǎng)的*高溫度是指在*適合溫度以上，微生物停止生長(zhǎng)的溫度。微生物生長(zhǎng)的*低溫度是指在*適合溫度以下，微生物停止生長(zhǎng)的溫度。在*低溫度和*適合溫度之間，微生物生長(zhǎng)的速度隨溫度的升高增加。在*適合溫度和*高溫度之間，微生物生長(zhǎng)的速度隨溫度的升高增加。在*適合溫度和*高溫度之間，微生物生長(zhǎng)的速度隨溫度的升高而降低。表5-2中列處了部分細(xì)菌在不同溫度條件下的生長(zhǎng)情況。
通常，工藝以上系統(tǒng)可以定期使用純蒸汽消毒，使管道系統(tǒng)重新回到系統(tǒng)微生物控制指標(biāo)優(yōu)良狀態(tài)下，如果工藝用水系統(tǒng)內(nèi)部的水始終保持在熱處理環(huán)境下，例如≥80℃，可以減少對(duì)管道系統(tǒng)定期進(jìn)行衛(wèi)生處理的頻率。
微生物對(duì)熱的耐受能力，因其細(xì)胞本質(zhì)及其環(huán)境條件不同而有所區(qū)別。工藝用水管道系統(tǒng)熱處理的溫度和時(shí)間條件，可以根據(jù)大多數(shù)細(xì)菌的耐熱情況適當(dāng)?shù)卮_定。表5-3為一些常見(jiàn)細(xì)菌的致死溫度及其時(shí)間。
在80℃熱處理?xiàng)l件下運(yùn)行的工藝用水系統(tǒng)，有經(jīng)驗(yàn)數(shù)據(jù)記錄顯示微生物生長(zhǎng)受到良好的控制。低于80℃的溫度的熱處理的實(shí)際作用必須根據(jù)實(shí)例的試驗(yàn)數(shù)據(jù)加以證明。需要注意上表列出的這個(gè)溫度范圍并不能去除工藝用水系統(tǒng)中的細(xì)菌內(nèi)**。細(xì)菌內(nèi)**的去除，必須通過(guò)將工藝用水處理系統(tǒng)設(shè)計(jì)成為具有去除熱原的能力。
表5-2部分細(xì)菌和**在不同溫度條件下的生長(zhǎng)情況
微 生 物
Microorganism 溫 度 范 圍
Temperature Range
*低
Lowest *適合
Best *高
Highest
無(wú)色桿菌（Achromobacter ichthyodermis） -2 25 30
嗜熱防線菌（Actinomyces ichihyodermis） 28 50 65
根癌病土壤桿菌（Agrobacierium tumefaciense） 0 25～28 37
枯草芽孢桿菌（B.thermophilus） 15 30～37 55
嗜熱糖化芽孢桿菌（Bacillus subtilis） 52 65 75
破傷風(fēng)俊狀芽孢桿菌（Clonridium tetani） 14 37～38 50
白喉棒狀桿菌（Corynebacterium diphtheriae） 15 34～36 40
大腸桿菌（Escherichia coli） 10 30～37 43
肺炎克氏桿菌（Klebsierlla pneumoniae） 12 37 40
嗜熱乳桿菌（L.thermophilus） 30 50～63 65
金黃色化濃小球菌（Mierococcus pyrogenes v.Aureus） 15 37 40
結(jié)核分枝桿菌（Mycobacterius tuberrhoeae） 30 37 42
淋病奈氏球菌（Neisseris gonorrhoeae） 5 37 55
銅綠色假單孢菌（Pseudomonas aeruginosa） 0 37 42
嗜熱鏈霉菌（Streptomyces thermophilus） 20 40～45 53
黑曲霉（A.niger） 7 30～39 47
灰綠葡萄孢霉（Botrytis nidulans） 0 15～25 35
尖鐮孢霉（Fusarium oxysporium） 4 15～32 40
蘋(píng)果青霉（Penicillium expansum） 0 25～27 30
酵母菌（Saccharomyces sp.） 0.5 25～30 40
普通變形桿菌（Proteus vulgaris） 10 37 43
（1）、巴氏消毒
巴氏消毒主要利用高溫處理來(lái)殺死微生物。高溫殺死微生物的能力極強(qiáng)，高溫可以凝固微生物細(xì)胞內(nèi)部的一切蛋白質(zhì)，鈍化其酶系統(tǒng)，造成細(xì)菌細(xì)胞的死亡。
經(jīng)典的巴氏消毒主要使用在食品工業(yè)中對(duì)牛奶進(jìn)行消毒處理，用以殺滅牛奶中的結(jié)核菌，同時(shí)還不會(huì)破壞牛奶中的新鮮維生素和蛋白質(zhì)，使牛奶成為安全的營(yíng)養(yǎng)品。采用巴氏消毒牛奶的工藝條件是，先將牛奶加熱到80℃，停留一定時(shí)間，進(jìn)行消毒，消毒后再冷卻至常溫，再出消毒器成為產(chǎn)品。為了節(jié)省能源，一般采用多效巴氏消毒器消毒牛奶。在多效消毒器中，**效是將冷牛奶與熱牛奶進(jìn)行熱交換器；**效是將加熱過(guò)的冷牛奶與蒸汽交換冷牛奶加熱至80℃并停留一般時(shí)間，完成對(duì)牛奶的消毒；第三效是將一效與冷牛奶交換過(guò)的熱牛奶用水冷卻至常溫出消毒器即成牛奶成品。
對(duì)水系統(tǒng)的細(xì)菌控制采用巴氏消毒的方法也可行，水中存在著雜菌，由于雜菌在熱水中不易生存，細(xì)菌不耐熱。一般消滅這些雜菌采用靜止水消毒時(shí)，消毒水水溫要加熱到95℃～100℃這樣才能達(dá)到*佳效果。當(dāng)用加熱器、膨脹水箱、水泵、80℃熱水的消毒流程時(shí)，由于水的高速流動(dòng)，不斷沖刷和加熱管道與設(shè)備中的介質(zhì)，使管道與設(shè)備介質(zhì)中的細(xì)菌無(wú)法藏身，同時(shí)受熱而亡，這樣用80℃的熱水，是能達(dá)到滅菌的目的，需要重視的是消毒操作和消毒處理時(shí)間。
表5-3常見(jiàn)細(xì)菌的致死溫度與時(shí)間
細(xì) 菌 種 類
Bacteria 致死溫度及時(shí)間
Lethal Temperature and Time
傷寒沙門(mén)氏桿菌（Salmonella typhi） 58℃ 30min
白喉棒狀桿菌（Corynebacterium diphtheriae） 50℃ 10min
嗜熱乳桿菌（Lactobacillus thermophilus） 71℃ 30min
普通變形桿菌（Proteus vulgaris） 55℃ 60min
大腸桿菌（Escherichia coli） 60℃ 10min
肺炎球菌（Pneumonococcus pneumoniae 56℃ 5～7min
維氏硝化桿菌（Nitrobacter winogradskyi） 50℃ 5min
粘質(zhì)賽氏桿菌（Serratia marcescens） 55℃ 60min
純化水系統(tǒng)中的活性炭過(guò)濾器和軟化器是有機(jī)物集中的地方，容易長(zhǎng)菌。巴氏消毒主要解決碳活性碳的清理、消毒工作。純化水系統(tǒng)中的活性碳在工作一段時(shí)間后，在活性碳的內(nèi)表面吸附堆積了不少有機(jī)、無(wú)機(jī)鹽和氯氣等有害物質(zhì)。特別是碳濾中的活性碳是細(xì)菌的滋生地，這些細(xì)菌在通過(guò)后續(xù)處理工序中的反滲透膜時(shí)，又不能被完全處理掉，這是對(duì)活性碳定期消毒處理的主要原因。
在過(guò)去傳統(tǒng)的操作中，只是對(duì)碳濾進(jìn)行正沖和反沖，正沖和反沖只能沖掉活性碳間的絮凝物，無(wú)法清理活性碳內(nèi)表面的吸附堆積物，用80℃±3℃的熱水來(lái)處理活性碳，一方面可以將活性碳內(nèi)表面吸附的堆積物沖刷出來(lái)，另一方面可以使活性碳內(nèi)表面的細(xì)菌生長(zhǎng)和繁衍，在熱處理?xiàng)l件下受到抑制，而自行死亡。這對(duì)充分發(fā)揮活性碳的作用，延長(zhǎng)活性碳的使用壽命，減少水系統(tǒng)的細(xì)菌量，產(chǎn)生不可估量的影響。
通?？刹捎冒褪舷痉ㄟM(jìn)行消毒處理，即用80℃的熱水循環(huán)1小時(shí)～2小時(shí)。結(jié)束時(shí)反洗，一則起再生作用，二則消毒，這種方法行之有效。純化水系統(tǒng)中的另一可以采用巴氏消毒處為純化水的使用回路。
（2）、純蒸汽消毒
純蒸汽滅菌其實(shí)就是采用濕熱滅菌的原理和方法，對(duì)主要工藝用水系統(tǒng)進(jìn)行滅菌處理。利用高壓純蒸汽這種熱力學(xué)滅菌手段，殺滅工藝用水系統(tǒng)中的設(shè)備（貯罐、泵、過(guò)濾器等）內(nèi)部和管道內(nèi)壁可能存在的細(xì)菌。純蒸汽滅菌系濕熱滅菌，其滅菌能力很強(qiáng)，極其有效，且在整個(gè)滅菌的過(guò)程中，沒(méi)有任何影響水質(zhì)的附加物或殘留物。純蒸汽滅菌是熱力學(xué)滅菌中*有效及用途*廣的方法。除工藝用水系統(tǒng)的滅菌以外，整個(gè)藥品生產(chǎn)工藝過(guò)程中，藥品、藥品的溶液、玻璃器械、培養(yǎng)基、無(wú)菌衣、敷料以及其他遇高溫與濕熱不發(fā)生變化或損壞的物質(zhì)，均可采用純蒸汽進(jìn)行滅菌。
⑴純蒸汽滅菌的原理
如前所述，純蒸汽滅菌即是濕熱滅菌。濕熱滅菌是指物質(zhì)在滅菌器內(nèi)（在主要工藝用水系統(tǒng)滅菌中為設(shè)備與管道零件等）利用高壓純蒸汽與其他熱力學(xué)滅菌手段殺滅細(xì)菌，高壓純蒸汽的比熱大、穿透力極強(qiáng)、很容易使蛋白質(zhì)變行、滅菌能力很強(qiáng)，是熱力學(xué)滅菌中*為有效及適用性*廣的方法。
在自然界，有機(jī)物生命的生存繁殖的理想范圍是-5℃～80℃之間，除了某些耐熱的芽孢以外，當(dāng)溫度高于這個(gè)范圍，生物體通常會(huì)死亡。濕熱滅菌即是利用微生物的這一特性，使用處于壓力下的滅菌蒸汽作為滅菌劑，使微生物細(xì)胞喪失繁殖能力，導(dǎo)致微生物死亡。
從微生物死亡的機(jī)理上講，微生物的死亡可追溯到細(xì)胞中主要蛋白質(zhì)及核酸的變性。這種變性是分子中氫鍵分裂所致，當(dāng)氫鍵斷裂時(shí)，結(jié)構(gòu)被破壞，分子從而喪失其功能。但應(yīng)注意，這種變性可以是逆轉(zhuǎn)的，也可能是不可逆轉(zhuǎn)的。如果氫鍵破裂的臨界數(shù)量未能達(dá)到，分子又可能回到原有的形式。
⑵與濕熱滅菌有關(guān)的常數(shù)
①D值
D值即微生物的耐熱參數(shù)，系指一定溫度下，將微生物殺滅90%（即使之下降一個(gè)對(duì)數(shù)單位）所需的時(shí)間。D值越大，說(shuō)明該微生物的耐熱性越強(qiáng)。不同的微生物在不同環(huán)境條件下具有各不相同的D值。
②Z值
Z值即滅菌溫度系數(shù)，系指使某一種微生物的D值下降一個(gè)對(duì)數(shù)單位，滅菌溫度應(yīng)升高度數(shù)，通常取10℃。
③Fr值
Fr值即T℃滅菌時(shí)間，為滅菌程序所賦予持滅菌品在T℃下的滅菌時(shí)間，以分表示，由于D值是隨溫度的變化而變化，所以要在不同濕度下達(dá)到相同的滅菌效果，F(xiàn)r值將會(huì)隨D值的變化而變化。滅菌溫度高時(shí)，F(xiàn)r值變小，滅菌溫度低時(shí)，所需Fr值就大。
④F0值
F0值即標(biāo)準(zhǔn)滅菌時(shí)間，系滅菌過(guò)程賦予待滅菌物品在121℃下的等效滅菌時(shí)間，即為T(mén)=121℃、Z=10時(shí)的F0值，121℃為標(biāo)準(zhǔn)狀態(tài)，F(xiàn)0值即為標(biāo)準(zhǔn)滅菌時(shí)間，以分表示。
⑤滅菌率L
L值指在某間溫度下滅菌一分鐘所相應(yīng)的標(biāo)準(zhǔn)滅菌時(shí)間的分鐘數(shù)，即F0和Fr的比值（L=F0/Fr）。當(dāng)Z=10℃時(shí)，不同溫度下的L值是不同的（見(jiàn)表1）。不同Z值下的滅菌率均可查得（見(jiàn)表2）。
⑥無(wú)菌保證值（SAL）
無(wú)菌保證值SAL（Sterility AssuranceLevel）為滅菌產(chǎn)品經(jīng)滅菌后微生物殘存機(jī)率的負(fù)對(duì)數(shù)值，表示物品被滅菌后的無(wú)菌狀態(tài)。國(guó)際上把該值定為6作為*低限度的無(wú)菌保證要求，即滅菌后微生物污染的概率不得大于百萬(wàn)分之一。
⑦純蒸汽滅菌條件
根據(jù)純蒸汽發(fā)生器的能力和工藝用水系統(tǒng)的復(fù)雜程度，可選擇如下條件進(jìn)行滅菌：
115.5℃ 30分鐘
121.5℃ 20分鐘
（3）工藝用水系統(tǒng)純蒸汽滅菌方法
①工藝用水管道進(jìn)行滅菌時(shí)，純蒸汽壓力為0.2Mpa;
②當(dāng)管道內(nèi)溫度升至121℃時(shí)開(kāi)始計(jì)時(shí)，滅菌35分鐘。滅菌指示帶應(yīng)變色，否則須重新滅菌；
③滅菌后如工藝用水系統(tǒng)若不立即使用，應(yīng)對(duì)系統(tǒng)充氮保護(hù)；
④貯罐等容器設(shè)備，純蒸汽滅菌前應(yīng)進(jìn)行清洗，滅菌后若過(guò)夜后使用，在使用前應(yīng)用注射用水再次淋洗。